Identificação molecular e perfil de resistência de V. Cholerae de ambientes aquáticos em zonas endémicas na província de Sofala após o ciclone IDAI

Abstract

Vibrio cholerae é uma bactéria Gram-negativa responsavel por causar cólera em humanos, faz parte da flora natural do ambiente aquatico de regiões temperadas e tropicais do mundo. O serogrupo O1 é responsavel por provocar surtos epidémicos de cólera, doença transmitida principalmente pela ingestão de alimentos ou agua contaminada. Em Moçambique a cólera é endémica. Objectivos: Este estudo teve como objectivo, avaliar a presença de V. cholerae O1 no ambiente aquatico na província de Sofala e determinar o perfil de resistência antimicrobiana (RAM) numa area fortemente afectada por uma epidemia de cólera após o ciclone Idai. Metodologia: A presente pesquisa é um estudo observacional transversal prospectivo, onde um total de 77 amostras de agua colhidas de valas de drenagem, poços e rio dos distritos de Dondo, Nhamatanda e Cidade da Beira foram analisadas. Isolados suspeitos de V. cholerae foram identificados fenotipicamente e confirmados por testes bioquímicos Kliger Iron Agar (KIA), Simmons Citrate Agar, Ureia Agar base, Sulphate Indol Motility (SIM). Foram realizados testes de susceptibilidade antimicrobiana in vitro pelo método de difusão em disco (Kirby-Bauer) para a determinação do perfil de resistência antimicrobiana e a para confirmação da presença de genes de virulência e resistência antimicrobiana foi usado o PCR convencional e sequenciamento. Posteriormente foram realizadas analises filogenéticas dos isolados e comparados com isolados criopreservados provenientes de amostras clínicas do período anterior ao ciclone Idai. Resultados: De 66 isolados suspeitos, 26 foram confirmados como V. cholerae O1 oriundos das amostras da Beira. Destes, 21 (80.8%), 12 (46,2%) e 1 (3,8%) foram resistentes a Ciprofloxacina, Cefotaxime e Gentamicina, respectivamente. Destes, 17 foram seleccionados, sequenciados e re-confirmados como sendo V. cholerae O1 e usando o programa Bioinformatico ResFinder demonstraram potencial resistência à Estreptomicina, Florfenicol, Cloranfenicol, Sulfametoxazol e Trimetroprina. Conclusões: Nossos dados demonstraram a importância do ambiente aquatico para a saúde pública como reservatório de V. cholerae patogénico e sugerem que houve a introdução de estirpes filogeneticamente mais próximas a isolados da Índia antes do ciclone Idai. A monitoria contínua de estirpes ambientais de V. cholerae e do perfil de RAM de estirpes epidémicas é crucial para as estratégias de controle da cólera